1、Mirus廣譜DNA轉染試劑TransIT®-LT1、TransIT®-2020和TransIT-X2®三者的區別是什么?

2、TransIT®-LT1轉染試劑的主要成分是什么?

3、TransIT®-2020轉染試劑的主要成分是什么？

4、TransIT®-2020適用于轉染哪些細胞？

5、ransIT-X2® Dynamic Delivery System的主要成分是什么？

6、TransIT-X2® Dynamic Delivery System和PEI（Polyethyeleneimine）是類(lèi)似的東西嗎？

7、TransIT-X2®可用于貼壁和懸浮細胞轉染嗎？

8、TransIT-X2®可以轉染原代細胞嗎？

9、TransIT-X2®可以轉染神經(jīng)細胞嗎？

10、抗生素會(huì )影響轉染試劑的作用嗎？

11、如何優(yōu)化轉染效率？

12、轉染結果不理想時(shí)該怎么辦？

1、Mirus廣譜DNA轉染試劑TransIT®-LT1、TransIT®-2020和TransIT-X2®三者的區別是什么?

TransIT®- LT1、TransIT®-2020和TransIT-X2®都是高效的廣譜轉染試劑，但它們的化學(xué)性質(zhì)不同，三者特點(diǎn)見(jiàn)下表。TransIT-X2是首選用于高效基因表達及敲除的廣譜轉染試劑。TransIT-X2能高效地轉染質(zhì)粒DNA和siRNA，也可用于二者共轉。TransIT®-LT1和TransIT®-2020僅適用于質(zhì)粒DNA的轉染。TransIT®-2020和TransIT-X2®都是無(wú)動(dòng)物源成分配方，因此可滿(mǎn)足有條件限制的應用需求，例如藥物開(kāi)發(fā)等。對于不同的細胞類(lèi)型，不同轉染試劑表現效果也有所不同，因此對于不同細胞類(lèi)型的具體應用，可以參考我們的轉染試劑推薦方案數據庫Reagent Agent。（https://www.mirusbio.com/tech-resources/transfection-database）

*注：目的基因敲除也可以通過(guò)轉染編碼shRNA的質(zhì)粒DNA來(lái)實(shí)現，但該方法敲除基因不如siRNA/miRNA高效。

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2、TransIT®-LT1轉染試劑的主要成分是什么?

TransIT®-LT1是一種非脂質(zhì)體的廣譜轉染試劑，主要配方是由脂質(zhì)及蛋白/聚胺混合物組成。它是市面上第一款脂類(lèi)/聚合物復合配方轉染試劑，同時(shí)具備高轉染效率和低細胞毒性特征。

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3、TransIT®-2020轉染試劑的主要成分是什么？

TransIT®-2020是一種專(zhuān)利的脂類(lèi)-聚合物混合配方轉染試劑，可與DNA形成多聚物脂復合物。TransIT®-2020配方中不含任何動(dòng)物源成分。

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4、TransIT®-2020適用于轉染哪些細胞？

TransIT®-2020是廣譜轉染試劑，適用于轉染多種類(lèi)型細胞。

· 細胞系，包括貼壁細胞和懸浮細胞（例如HepG2, MCF-7, Neuro-2a，K562，Jurkat等）點(diǎn)擊右側鏈接可以查看適用TransIT®-2020轉染的細胞系類(lèi)型View a complete listing of cell lines transfected using TransIT®-2020 (PDF)，

· 原代細胞和干細胞View a complete listing of primary and stem cells transfected using TransIT®-2020 (PDF)。

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5、TransIT-X2® Dynamic Delivery System的主要成分是什么？

TransIT-X2® Dynamic Delivery System是一種先進(jìn)的非脂質(zhì)體轉染系統，由一種全新型聚合物搭配Mirus專(zhuān)利配方，更容易與核酸形成復合物，適用于質(zhì)粒DNA與小分子核酸如siRNA、miRNA、pre-miRNA等的高效轉染。此外，TransIT-X2®還能實(shí)現質(zhì)粒DNA與siRNA共轉染。TransIT-X2®配方中不含任何動(dòng)物源成分。

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6、TransIT-X2® Dynamic Delivery System和PEI（Polyethyeleneimine）是類(lèi)似的東西嗎？

不是的。TransIT-X2®是一種全新的聚合物配方，并非基于PEI的改良產(chǎn)品。

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7、TransIT-X2®可用于貼壁和懸浮細胞轉染嗎？

可以。經(jīng)測試，我們已經(jīng)用TransIT-X2成功轉染過(guò)多種貼壁細胞（如CHO-K1，HepG2，原代人乳腺上皮細胞等）和懸浮細胞（如Freestyle 293-F等）。

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8、TransIT-X2®可以轉染原代細胞嗎？

可以。TransIT-X2®適用于轉染多種原代細胞，我們已經(jīng)測試過(guò)HUVECs，原代人乳腺上皮細胞（HMEC）以及正常人皮膚成纖維細胞（NHDF）等原代細胞轉染效率都不錯。

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9、TransIT-X2®可以轉染神經(jīng)細胞嗎？

可以。我們測試過(guò)iCell® Neurons, SH-SY5Y, SK-N-MC and PC-12等神經(jīng)細胞轉染效率都很不錯。點(diǎn)擊右側鏈接可以查看適用TransIT-X2®轉染的細胞類(lèi)型以及推薦用量。View a complete listing of cell types transfected using TransIT-X2® by Mirus scientists and corresponding starting reagent-to-nucleic acid ratios. (PDF)

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10、抗生素會(huì )影響轉染試劑的作用嗎？

某些抗生素如卡那霉素是陽(yáng)離子，會(huì )抑制轉染試劑/核酸形成復合物，因此我們建議在轉染試劑復合物形成這一環(huán)節不要使用抗生素。待轉染試劑復合物形成后，我們就可以加入到含有低水平抗生素的完全細胞培養基里了（例如將100×青-鏈霉素雙抗稀釋到0.1-1×工作濃度的細胞培養基）。

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11、如何優(yōu)化轉染效率？

1）      轉染時(shí)的細胞密度 (%) ：大多數細胞在轉染時(shí)細胞密度最好能達到40%-80%，但是不同類(lèi)型細胞有其最佳的轉染密度，在優(yōu)化轉染效率時(shí)要先確認細胞的最佳轉染密度；

2）      轉染試劑與DNA比例：轉染試劑與DNA的使用比例通常是1-4ul每1ugDNA，不同細胞可根據實(shí)際轉染效率進(jìn)行不同配比的優(yōu)化；

3）      DNA質(zhì)粒的質(zhì)量：轉染用的DNA必須是無(wú)菌，高濃度，且去除內毒素的質(zhì)粒。Mirus有一款內毒素去除試劑盒（MiraCLEAN® Endotoxin Removal Kit，貨號MIR5900/MIR5910）可以去除質(zhì)粒中殘存的內毒素；

4）      轉染試劑與核酸形成復合物要在無(wú)血清的培養基中進(jìn)行：血清可能會(huì )干擾轉染試劑與核酸形成復合物，因此在配置轉染試劑與核酸復合物時(shí)需要用無(wú)血清、無(wú)抗生素的培養基，而將復合物加入細胞的時(shí)候，細胞培養基里是可以含血清的。

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12、轉染結果不理想時(shí)該怎么辦？

Mirus每款轉染試劑的說(shuō)明書(shū)最后都有TROUBLESHOOTING GUIDE，可以幫助客戶(hù)對照結果查找問(wèn)題原因，大部分轉染不理想的問(wèn)題都可以通過(guò)優(yōu)化操作步驟來(lái)解決，因此每一個(gè)使用Mirus轉染試劑的客戶(hù)，都應在轉染前認真閱讀產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。

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